土屋昌次(1544-1575)是金丸筑前守虎義的次子，幼名平八郎，武田信玄的“奧近習六人衆”之一，武田家年輕一代裏的猛將，對野戰和城戰都出衆的才能。
土屋昌次是金丸筑前守虎義的次子，幼名平八郎，武田信玄的“奧近習六人衆”之一(另外五個是三枝守友、武藤喜兵衛、甘利昌忠、曾根昌世和長阪源五郎)，武田家年輕一代裏的猛將，對野戰和城戰都出衆的才能。
土屋昌次的初陣就是第四次川中島合戰，當時他年僅十七歲。在這場戰役中，他表現異常活躍，負責守衛信玄的本陣，毫無驚慌失措，在上杉軍的猛攻之下，始終不曾後退過一步，他的武勇連信玄也爲之感慨。這場戰役之後，昌次因功被信玄要求繼承武田氏的名族土屋氏並正式改名爲土屋昌次。
在三方原合戰中，土屋昌次接受德川氏大將鳥居元忠的一騎討，並且擊敗了鳥居元忠，因此而得到了雙方的讚揚。
土屋昌次是信玄近侍出身，對信玄十分忠誠。在信玄病死之後，曾意欲殉死追隨信玄公而去，但是爲弾正忠正高阪昌信所勸。(當時高阪昌信不也總想自殺殉死麼……)
長篠合戰中，土屋昌次和穴山信君、馬場信房、真田信綱、真田昌輝、一條信龍率領三千騎兵的武田軍右翼隊。面對織田信長的三千支鐵炮，昌次所在的部隊雖然突破了第二道防馬柵，但還是被鐵炮擋在了最後一道防馬柵之後。5月21日下午1時，昌次在隨山縣昌景一起突破馬防柵衝鋒攻擊時，兩人均遭鐵炮擊中身亡，昌次時年僅三十二歲。
